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免疫荧光IF



 基本原理

免疫荧光顾名思义是免疫和荧光的组合运用。其运用的是免疫学的基本反应抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性,所以当抗原抗体发生反应时,只要知道其中的一个因素,就可以查出另一个因素。免疫荧光就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后显色,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。从而对其被标记物进行定位、定性及定量的研究。广泛应适用于组织学、胚胎学、病理学教学与科研。根据免疫反应级联数又分为直接法和间接法,但组织免疫荧光通常使用间接法。

直接法是将标记的特异性荧光抗体,直接加在抗原标本上,经一定的温度和时间的孵育染色,用水洗去未参加反应的多余荧光抗体,室温下干燥后封片、镜检

间接法是先用已知未标记的特异抗体(第一抗体)与抗原标本进行反应,用水洗去未反应的抗体,再用标记的抗体(第二抗体)与抗原标本反应,使之形成抗原抗体抗体复合物,再用水洗去未反应的标记抗体,干燥、封片后镜检。

 

 

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实验信息(以下信息,请正确填写,以保证实验的正常进行)
  • 一、样本预处理
  • 1.1、样本种属 : 小鼠 大鼠 其他 *
  • 1.2、寄送样本状态 : 骨类组织, 非骨类组织, 蜡块 石蜡切片 冰冻切片 细胞爬片 已染色切片 已拍摄照片 组织芯片 *
  • 1.3、组织类型: *
  • 1.4、组织预处理方式: *
  • 二、切片
  • 2.1、切片方向:

    如图所示:
    平行A面 平行B面 平行C面 随机 参见描述

    注:如样品不规则,请自行描述或标记切片方向,否则,按随机处理,结果不可修改,且由甲方承担。


    切片方向描述: *

  • 2.2、切片厚度: μm/片(大于等于3 μm/片)*
  • 2.3、每个样本切片数量: 片/样本*
  • 2.4、所有组织切片总数量: *
  • 三、染色
  • 3.1、显示方式:

    HE染色, Masson染色, Nissle染色, DAB显色, 荧光单染, 荧光双染, TUNEL凋亡, 其他,

  • 3.2、是否提供抗体或试剂盒

    不提供抗体或试剂盒
    提供

    品牌 货号 抗体名称 数量 推荐工作浓度 备注
    +

  • 四、拍照
  • 4.1、拍照预期视野描述:*

    (补充描述,可以发参考资料到如下邮箱labex@univ-bio.com)

  • 4.2、拍照放大倍数(目镜x物镜): 50X 100X 200X 400X
  • 4.3、合计白光拍照,照片数量: *
  • 4.4、合计荧光单染拍照,照片数量: *
  • 4.5、合计荧光双染拍照,照片数量: *
  • 4.6、全片扫描,照片数量: * (请选择扫描倍数:200倍,还是400倍)
  • 4.7、激光共聚焦拍摄,照片数量: *
  • 4.8、图片是否需要添加比例尺:
  • 4.9、需求图片格式: *
  • 五、样本信息
  • 5.1、样本情况:(如样品数量较多,此处可只填写样本概况,详情可以邮件发送电子版至labex@univ-bio.com)

    是否上传文件: 点击这里上传文件 【注 :目前支持*.xls,*.xlsx,*.docx,*.doc,*.pdf上传】

    样本分组 样本编号 样本数量 备注
    +

  • 5.2、送样方式
    注:
    1,优宁维免费配送一次(客户也可自行邮寄,但须自理邮费)
    2,寄送地址:上海市浦东新区古丹路15号18号楼4楼
    3,联系人及电话:刘美13764270135或者4008-168-068转3。

  • 5.3、样本和试剂是否需要返还*



    返回地址* 联系人及联系方式*
  • 六、其他补充信息
  • 6.1、是否已经进行预实验:

  • 6.2、预实验样品及建议:(注:如果已有成熟的实验条件,不需要预实验,请填写“无”)*

    预实验样品及建议:

  • 6.3、其他补充事项,请说明

  • 7、是否需要加急:
    小于等于5000元订单收取30%加急费用;超过5000元订单收取20%加急费。5个工作日内出结果。(特殊订单除外,一切解释权归优宁维公司所有)
  • 提示:
    一、请核对信息后提交,优宁维工作人员会在提交后24小时内联系您。
    二、免疫组化实验样本冰袋运输,除此之外蛋白检测实验一律在干冰条件下运输。
    三、科研实验不可预知性告知:科学实验研究具有实验结果不可预知性,实验项目可能出现与客户预期不吻合的实验结果,甲方愿意接受实验服务项目中存在的结果不可预知风险。
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荧光染色常规项目举例
样本类型 染色方式 品牌 货号 目标蛋白
人肿瘤组织 荧光双染 abcam ab28364,ab83508 NG2,CD31
小鼠皮肤和耳朵 荧光双染 Proteintech 17342-1-AP CD11c
小鼠皮肤和耳朵 荧光双染 Proteintech 14395-1-AP α-smooth muscle Actin
小鼠皮肤和耳朵 荧光双染 Proteintech 14395-1-AP α-smooth muscle Actin
小鼠脑 荧光单染 abcam ab32096 p-CREB
小鼠脑 荧光单染 abcam ab10158 Histone H4
小鼠脑 荧光单染 abcam ab68853 synaptotagmin
小鼠小肠,肝,肾 荧光双染 abcam ab170904 P Glycoprotein,外加DAPI
小鼠心肌 荧光双染 CST 8242 NF-Kb,外加DAPI

货号:IF001

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1)血清、血浆、尿液、灌洗液、组织、细胞沉淀、裂解蛋白等,未经过反复冻融,且用量满足实验要求的最低标准。

2)组化实验组织样本,需经过10%中性缓冲福尔马林固定24-72小时后,转移到75%酒精中送样,且保证样品管上标记清晰,不会被酒精渗漏模糊掉字迹。

3)组化实验蜡块和切片样本,常温运输,尽可能使用盒子装蜡块,避免互相之前摩擦影响样本;切片使用切片盒放置,避免玻片之间相关刮创。

4)您必须明确说明提供给乙方的实验材料的安全性,确保无致病性、无传染性,对人、动植物和环境友好安全,以保证实验技术人员的安全。

5)珍贵样本,请您只提供满足实验服务合同的所需量,剩余样本自己保存好以免造成样本的浪费,耽误您的实验进展。

6)甲方任何样本准备过程中的疑问,均可以咨询乙方。或者发邮件至labex@univ-bio.com,或者拨打4008-168-068转3。

2.为保证实验准确性,您需知悉以下内容:

1)非试剂盒验证样本,存在检出率低的风险,客户知晓并同意的情况下,Labex配合开展实验。

2)检出率是在MSD标准曲线范围内的数据,样本内因子含量超出标准品检测范围的情况下:若低于MSD标准曲线范围,则无法检出;若超过标准品检测上限,需实进一步稀释样本优化实验。MSD技术是目前市场上检测范围最宽(横跨4-5log)的多因子检测技术,但蛋白质组几万种蛋白浓度横跨10 log,不能一概而论。

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1)您可自行送样(方式包括快递以及亲送)到我们指定地点,但过程中要保证正确的运输条件,干冰货物或冰袋运输务必保证干冰充足和冰袋低温。并及时通知到我们,方便我们接收。

您还需要准备一份随样单(合同附件所示),标注您的姓名、合同号、样本信息、试剂信息,随快递一起寄送。

若由于您运输条件的原因,导致实验结果问题,相关责任由您承担。

实验室接收样本联系方式,提供寄送咨询: labex@univ-bio.com4008-168-0683

2)若您需要我们协助寄送样本时,我们会收取合理的寄送费用,以我们标准合同上所列收费为准。

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